氯霉素是一種抗生素，對傷寒、百日咳、肺炎等具有良好的治療作用，但長期使用可引發再生障礙性貧血，因而監控其在動物源食品中的殘留對開展畜產品檢測及保障食品安全工作有重大意義，可采用液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素。

液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素儀器設備

液相色譜儀

紫外檢測器，

SPE固相萃取裝置

氮吹儀

超聲清洗儀

渦旋振蕩儀

離心機

試劑材料濃縮奶；氯霉素標品；甲醇（色譜純）；乙腈（分析純）；乙酸乙酯（分析純）。

色譜柱：C18（5 μm，120 Å，4.6×250 mm，）

液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素樣品制備

準確稱取牛奶5 g（到0.001），加入乙酸乙酯15 mL，渦旋振蕩1 min，搖床振蕩10 min。3000 r/min離心10 min。將上清轉移至試管，于45 ℃氮吹儀吹干，用5 mL乙腈-水溶液（5 : 95，v/v）再溶解，超聲10 min，待凈化。
SPE柱凈化

1. 活化：C18固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水活化。
2. 上樣：將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。
3. 淋洗：用4 mL×2次乙腈-水溶液（5 : 95，v/v）淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液，抽干10 min。
4. 洗脫：用8 mL乙酸乙酯洗脫固相萃取小柱，收集洗脫液。
5. 重新溶解：洗脫液于45℃氮吹吹干，加1 mL乙腈-水溶液（2 : 8，v/v），超聲10 min溶解，0.45 μm微孔濾膜過濾，供液相色譜儀測定。
   
   

色譜條件

色譜柱：C18（5 μm ，120 Å，4.6×250 mm，）

檢測器：UV3000型紫外/可見光檢測器

檢測波長：UV 268 nm 

流動相：甲醇/水 = 60/40（v/v）          

流速：0.8 mL/min

柱溫：25 ℃                   

進樣量：20 μL

采用此方法進行奶制品中氯霉素含量的液相測試，添加回收率達到97.24%，表明AE.SPE-C18 及C18適于乳制品中氯霉素的純化和測試。